HotStart DNA聚合酶

概述：
 hot start taq dna聚合酶是由普通taq dna聚合酶经过化学修饰得到，在室温时处于失活状态，需要经过高温（95°c）激活，可以有效减少pcr过程中的非特异性产物，具有更高的特异性和产率(1)。在使用时，pcr反应液应在95°c预加热8~10分钟进行激活，之后按照正常的pcr反应程序进行。被激活的酶和taq dna聚合酶功能一致，催化5’-3’dna合成，缺少3’-5’校正活性(2,3)。hotstart taq dna聚合酶适用于热启动pcr，所有操作过程可在室温完成，使用方便。
 来源：
 来源于一种重组的 e.coli 菌株，该菌株含有来源于thermusaquaticus yt-1的taq dna聚合酶基因。
 应用：
 热启动pcr，rt-pcr，长度达到3kb的基因组dna和cdna的特异性扩增，低拷贝模板的扩增，实时定量 pcr，多重pcr，具有3’-da末端产物的扩增（适用各种ta克隆系统）。
 反应条件：
 10× 反应缓冲液(含15mm mgcl2)：670mm tris-hcl (ph 8.3 @ 25°c)，160mm (nh4)2so4，15mm mgcl2，0.1%tween 20。
 质量检测:
 pcr功能测试：以人基因组dna为模板，扩增单拷贝antitrypsin基因，产物长度357bp，相比于taq dna聚合酶有效减少非特异性产物并具有更高的产物产量。
核酸内切酶活性：50μl反应体系中，20u该酶于1μg的hindiii消化的λdna于37°c温浴4小时，电泳条带无明显变化。
核酸外切酶活性：50μl反应体系中，20u该酶于1μg的puc19质粒于37°c温浴4小时，电泳条带无明显变化。
 质保声明：
 hot start taq dna聚合酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
 单位定义：
 1单位指经高温激活后，在72°c反应30分钟，能够使10nmol 的dntp掺入酸不溶性沉淀所需要的酶量。
 参考文献:
 1. d‘aquila,r.t., etal.,maximizing sensitivity and specificity of pcr by preamplificationheating, nucleic acidsres., 19,3749, 1991.
2. moretti, t., etal.,enhancement of pcr amplification yield ans specificity usingamplitaqgold dna polymerase,biotechniques,25,716-722,1998. 
3. weyant, r.s., etal., effectof ionic and nonionic detergents on the taqpolymerase, biotechniques,9, 309-308, 1990.

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天津强微特生物科技有限公司
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